Seserų pašaukimas Šv. Jono seserys siekia krikščioniško gyvenimo pilnatvės – Kryžiaus išminties, vienydamosis su Švč. Mergele Marija paskutiniuoju jos gyvenimo žemėje tarpsniu nuo Atjautos slėpinio iki Dangun Ėmimo, jai gyvenant šalia Apaštalo ir Evangelisto Jono. Vìsas jų gyvenimas yra nepaliaujamas „grįžimas pas Tėvą“ (Vado ad Patrem, žr. Jn 14, 12.28; 16, 10.17.28) per Jėzų Marijoje, visą savo žmogišką prigimtį, asmenį ir netgi silpnumus bei žaizdas atveriant visa apimančiam ir nenugalimam Tėvo traukimui Nukryžiuotajame: „Kai būsiu pakeltas nuo žemės, vìsa patrauksiu prie savęs“ (Jn 12, 32 Vulg.). Dėl to seserų vidinės maldos gyvenimas sutelktas į šlovingojo Kryžiaus slėpinį per Eucharistiją, bendrystėje su Šv. Jono broliais vis labiau gyvenant Mylimojo Sūnaus kunigyste ir Moters (žr. Jn 2, 4; 19, 26 ir Apr 12, 1–17), papildančios ir išbaigiančios karališkąją savo Sūnaus auką, kunigyste.